中国台湾金标免疫层析读数仪市场价

来源: 发布时间:2021-02-25

原料颗粒胶体金颗粒大小的选择取决于胶体金结合物的用途。如下段落描述了两个常用的胶体金应用领域:显微检测技术和快速诊断技术。显微检测技术任何1-40nm的胶体金结合物可以应用于电子显微镜和光学显微镜检测领域。然而即使在透射电镜放大25万倍的情况下,也不可能观测到1或2nm的胶体颗粒。利用银增强胶体金技术可以让终端客户能够看到胶体金标记的这种较小的抗原性位点。银增强染色技术是指通过银盐在胶体金颗粒表面沉积,使胶体金颗粒增大到在显微镜下能观察的尺寸。当所有的胶体金颗粒都是同样大小和形状时,该方法具有效率高、易控制的特点且低变异系数。使用如1-2nm的胶体金小颗粒时,由于空间位阻较大的胶体金颗粒不能标记的一些抗原决定簇位点,也变得容易接近。因而,一旦确定抗原位置,在银增强染色技术作用下,金标记变得容易联接和形成。在不采用银增强染色电镜技术的情况下,几个不同的抗原反应决定簇可能被标记在相同的片段上。在这种情况下,采用可分辨出的不同尺寸大小的胶体金标记特异性抗体,该抗体对不同反应决定簇具有特异识别。 能快速进行对目标因子及蛋白含量、食品添加剂及保化品类等多种安全因素的快速筛查,检测快速、结果准确。中国台湾金标免疫层析读数仪市场价

胶体金标记蛋白的纯化(1)超速离心法:根据胶体金颗粒的大小,标记蛋白的种类及稳定剂的不同选用不同的离心速度和离心时间。用BSA做稳定剂的胶体金—羊抗兔IgG结合物可先低速离心(20nm金胶粒用1200r/min,5nm金胶粒用1800r/min)20min,弃去凝聚的沉淀。然后将5nm胶体金结合物用6000g,4℃离心1h;20nm~40nm胶体金结合物,14000g,4℃离心1h.仔细吸出上清,沉淀物用含1%BSA的PB液(含0.02%NaN3),将沉淀重悬为原体积的1/10,4℃保存。如在结合物内加50%甘油可贮存于-18℃保存一年以上。为了得到颗粒均一的免疫金试剂,可将上述初步纯化的结合物再进一步用10%~30%蔗糖或甘油进行密度梯度离心,分带收集不同梯度的胶体金与蛋白的结合物。中国台湾金标免疫层析读数仪市场价**的光电一体化解决方案,保障了优良的检测重复性。

胶体金的稳定性及免疫胶体金的贮存:胶体金具有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚,但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性,如蛋白质、葡萄糖、PEG20000 等的加入有良好的稳定效果。当金溶胶吸附蛋白质后,溶胶的稳定性随溶液pH 而变化,而这种变化又取决于吸附蛋白质的等电点,如ConA ,过氧化物酶等,当pH 较低时保持稳定,提高pH 则显得不稳定,接近等电点或略高时又变得稳定了。标记后的胶体金溶液可用0.2 ~0.5mg/ml PEG20000 作为稳定剂。在4 ~10℃ 贮存数月有效,不宜冰冻。

免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面,无共价键形成,标记后大分子物质活性不发生改变。3、胶体金的示踪原理金颗粒具有高电子密度的特性。金标蛋白在相应的配体处大量聚集时,在显微镜下可见黑褐色颗粒或肉眼可见红色或粉红色斑点。免疫金银染色:利用金颗粒可催化银离子还原成金属银这一原理,通过银颗粒的沉积,在光镜下可见抗原抗体反应的阳性部位呈现银的黑褐色。分别测试反射率范围为[0.2,0.8]内高、中、低反射率的3条质控条,CV≤3%。

胶体金溶液是指分散相粒子直径在l—150 nm之间的金溶胶,属于多相不均匀体系,颜色呈桔红色到紫红色.胶体金作为标记物用于免疫组织化学始于1971年,Faulk等应用电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察沙门氏菌,此后他们把胶体金与多种蛋白质结合.1974年Romano等将胶体金标记在第二抗体(马抗人IgG)上,建立了间接免疫胶体金染色法。1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用。胶体金在免疫化学中的这种应用,又被称为免疫金.之后,许多学者进一步证实胶体金能稳定又迅速地吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显改变.它可以作为探针进行细胞表面和细胞内多糖、蛋白质、多肤、抗原、核酸等生物大分子的精确定位,也可以用于日常的免疫诊断,进行免疫组织化学定位,因而在临床诊断及药物检测等方面的应用已受到重视.目前电镜水平的免疫金染色(IGS),光镜水平的免疫金银染色(IGSS),以及肉眼水平的斑点免疫金染色技术日益成为科学研究和临床诊断的有力工具.检测操作简单,一般1-3个步骤即可完成快速定量检测。中国台湾金标免疫层析读数仪市场价

采用现代光电技术,用光电传感器测量反射光强度,定量或定性分析金标试纸颜色深浅,计算被测物含量或浓度。中国台湾金标免疫层析读数仪市场价

从亲和层析柱上洗脱下的高亲和抗体应该是高亲和抗体,从而可以产生高特异性的胶体金结合物。这些抗体可能需要进一步的处理以避免交叉反应。虽然亲和纯化法耗费大量的时间、经费、血清,但是通过该方法可以获取任何免疫分析必需的关键原料——高质量的结合物。抗原的标记成功制备抗原标记物依靠两个因素:控制抗原与胶体金颗粒联接的三种氨基酸残基的空间位置和抗原大小。大多数的抗原标记物是被使用在快速检测试纸上,例如血清的双抗体夹心法或竞争法检测。在这种情况下,通常选择40nm胶体金颗粒。直到近期,研究人员发现,40nm胶体金颗粒标记的蛋白分子量下限为30KD.然而在某些条件下,通过先进的标记技术可以将该限制降低到一半至15KD.使用这些小颗粒标记的主要限制是被标记蛋白必须包含足够数量的赖氨酸、色氨酸和半胱氨酸残基。抗原常不含有足够的半胱氨酸残基,以至抗原和胶体金颗粒之间的结合力相对较弱且容易断裂,尤其在样本中存在高亲和力的抗体时。对于分子量低于30KD的抗原,通常采用其他技术方法,例如标记较小的胶体金颗粒。在检测线处由于胶体金颗粒过小使得可见度低很可能导致灵敏度降低。 中国台湾金标免疫层析读数仪市场价

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