填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提**离度,但不是*有的因素。如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选择更小粒度的填料是很有用的,3um填料填充柱的柱数比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3um的色相谱的背压却是5um的2倍。与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选择更短的色谱柱,以缩短分析时间,另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力。三、如何保证良好的柱性能与柱寿命◆认证阅读色谱柱使用说明书;◆使用填充良好的色谱柱;◆尽量减少压力波动,避免机械及热冲击;◆使用保护柱及在线过滤器;◆经常以强溶剂冲洗色谱柱;◆充分过滤样品及流动相,尽量避免杂质微粒与强保留成分;◆用稳定的固定相(C18**稳定);◆在中等PH值操作(6~8),用有机缓冲溶液;◆色谱柱使用温度小于40℃;◆硅胶基质的的色谱柱,应保持流动相的PH值范围在◆在水流动相与缓冲溶液中加200ppm的叠氮钠;◆流动相中含有缓冲溶液,应注意应95∶5的水及有机溶剂过渡,有机溶剂不能低于5%;◆过夜或贮存时。测试条测试浓度范围可以从1mg/I、10mg/I直到g/I。北京上海默克
改善全世界人们的生活是我们不懈追求的目标。在通往这个目标的道路上,我们保持着好奇心,不断进行探索研究,制定未来发展计划。默克拥有351年的历史。1668年,弗雷德里奇·杰考伯·默克在德国达姆施塔特成立的公司是默克家族公司的起源。目前,默克的主要所有人仍是弗雷德里奇·杰考伯·默克(FriedrichJacobMerck)的后代。此后,公司不断发展,**终成为了一个真正的全球化公司。全球超约56000名员工服务于默克,我们的员工致力于突破性解决方案和技术的研发工作。2016年,我们共投入20亿欧元用于研发。我们拥有“默克”这一名称和品牌的所有权。***的例外是在美国和加拿大,我们使用EMDSerono(用于生物制药业务)、MilliporeSigma(用于生命科学业务)和EMDPerformanceMaterials(用于材料业务)作为品牌名称。北京上海默克为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。
并放在稳定的环境中存放。2、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落,避免造成色谱柱性能的降低。色谱柱色谱柱的再生用相当于20倍柱体积的溶剂按下列顺序冲洗柱子,建议按柱子的箭头方向冲洗,尽可能不反冲。冲洗时使用的的参考溶剂顺序是水、甲醇、氯仿、异丙醇。色谱柱性能评价编辑色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。在正常条件下,填料粒度>20μm时,干法填充制备柱较为合适;颗粒<20μm时,湿法填充较为理想。填充方法一般有4种:①高压匀浆法,多用于分析柱和小规模制备柱的填充;②径向加压法,Waters**;③轴向加压法,主要用于装填大直径柱;④干法。柱填充的技术性很强,大多数实验室使用已填充好的商品柱。必须指出,高效液相色谱柱的获得,装填技术是重要环节,但根本问题还在于填料本身性能的优劣,以及配套的色谱仪系统的的结构是否合理。无论是自己装填的还是购买的色谱柱,使用前都要对其性能进行考察,使用期间或放置一段时间后也要重新检查。柱性能指标包括在一定实验条件下(样品、流动相、流速、温度)下的柱压、理论塔板高度和塔板数、对称因子、容量因子和选择性因子的重复性,或分离度。
由于其特殊的性质,一般***于特殊的用途。如墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于HPLC流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC,氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可在PH高达12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强,应用范围受到一定的限制,所以未能广泛应用,新型氧化诰填料也可用于HPLC,商品化的*有聚合物涂层的多孔氧化诰微球色谱柱,应用PH范围1~14,温度可达到1000C。由于氧化诰填料几年才开始研究,加之前的实验难度,其重要用途与优势尚在进行中。4怎样选择填料粒度目前,商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3,5和10um填料,填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提**离度,但不是***的因素。如果固定相选择是真确,但是分离度不够。上海高信化玻提供德国默克乙腈。
MERCKMILLIPORE默克密理博Direct-Q3纯水超纯水系统市场价。Millipore密理博MERCKMILLIPORE默克密理博Direct-Q3系统的设计使得操作时简单而直观。水质参数(电阻率或电导率、温度)在明亮的彩色显示屏上显示。Direct-Q3系统可定量供应I级水并在供应了预先设定的体积后自动关闭。产水适合于大多数I级水用量小的实验室,其中包括适用于液体层析分离和生化实验的缓冲液配制、适用于分析技术(分光光度学和光谱学)的溶液配制以及培养基配制。对于要求**有机污染物含量的应用,Direct-Q3UV系统中还加入了一个双波长UV灯以确保产水TOC小于5ppb,使之适合于HPLC、GC、ILC和TOC分析。MERCKMILLIPORE默克密理博RiOs5/8/16水纯化系统市场价。Millipore密理博直接生产III级实验室用水,产水流速可达16L/hRiOs系统以稳定的流速产生III级实验室用纯水系统直接使用自来水做进水,将辅助纯化技术结合在一个紧凑的系统设计中,不仅操作方便、可靠,还允许以低操作成本对产水水质进行***控制。应用玻璃器皿清洗增湿器、高压高温灭菌器、清洗机进水Milli-Q®。测试条是一种真正的高科技产品。北京上海默克
色谱柱的柱管多用不锈钢制成,压力不高于70 kg/cm2 。北京上海默克
液相色谱柱的管理与保养色谱柱是液相色谱的心脏,在液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。因此,有必要加强和规范色谱柱的管理,从而延长色谱柱的使用寿命。本文从影响色谱柱使用寿命的几个因素出发,从管理的角度,探讨色谱柱的维护与保养。1色谱柱的类型常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶、离子交换树脂、凝胶或玻璃微球等填充剂。在化学键合硅胶中以十六烷基硅烷键合硅胶*常用,辛基硅烷键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用。近年来,由于蛋白质等生物大分子物质分离提纯技术的飞速发展,离子交换色谱柱、凝胶色谱柱的应用也越来越广。2影响色谱柱使用寿命的因素流动相※在以水溶液为流动相时,水溶液中的微生物例如细菌容易生长,当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时,一些霉菌可能在色谱柱中滋生,堵塞固定相颗粒间的空隙。※由于湿法填充技术的问世,目前普遍使用的色谱柱填料直径一般都小于10um。北京上海默克