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来源: 发布时间:2021-05-29

芯片与常规切片免疫组化标记的比较 常规制片免疫组化阴性,而组织芯片免疫组化阳性者包括ER2例,PR1例;常规制片免疫组化阳性,而组织芯片免疫组化阴性者包括nm23、Her-2各1例。而部分病例常规制片免疫组化和组织芯片免疫组化阳性表达强度略有不同。组织芯片的免疫组化结果与常规制片免疫组化比较,统计学处理差异无显现性。3.3 规格组织芯片免疫组化效果的比较 在本观察中,使用1.0mm大小的组织芯进行免疫组化染色所得的结果和使用0.5mm组织芯所得结果一致,表明组织芯大小并不影响实验结果,关键是在组织芯片制作过程中认真观察原始常规切片,选取表示性区域并准确标记,在受体蜡块相应位置采取组织芯块。在同样面积的芯片,可以排列较多数量的小尺寸组织芯块,较容易包含大量研究病例有关免疫组化,HE染色,免疫荧光服务就找融享生物。江苏IHC免疫组化公司哪里有

基本原理编辑

抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以期达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。分类编辑

免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。


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免疫组化,是应用免疫学基本原理—抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。

    如肽类、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等等均可用免疫组织化学方法显示,因而目前在基础与临床科研中被广泛应用。较近几年,分子生物学研究异常活跃,但较终还要归到形态上来。用免疫组织化学方法对所研究的大分子分子进行定位,进而深入研究其功能。免疫组化技术免疫组织化学编辑染色方法1.直接法荧光素直接标记特异性抗体(—抗)上,标记抗体与抗原结合(在切片上)荧光显微镜下观察→检测抗原。△酶标抗体要显示后镜检。直接法优点:简单,时间短,特异性强。缺点:灵敏度低,所需抗体量大(不经济)。应用:基本不用!2.间接法荧光素标记在二抗上(二抗:抗产生一抗动物的IgG抗体)。※显色后镜检特点:较直接法灵敏,可标记一种抗体→鉴定多种抗原。3.非标记Ab桥法:“桥法”是酶标记抗体的改进,经过三次抗体,其二抗为未标记桥抗体。(1)单桥法(2)双桥法在三抗之后,将二抗和三抗再重复一次,可增大染色强度。★特别提示:注意动物种属关系4.***法(过氧化物酶—抗过氧化物酶法Peroxidaseanti—peroxidasemethod,***法)~是桥法的改良,既先形成***复合物→抗原—抗体—抗IgG抗体—***复合物。该法简化了操作步骤,提高了灵敏度。上海融享专注免疫组化服务。

被检测的物质

组织或细胞中凡是能作为抗原或半抗原,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。

6、特点

1)特异性强

免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时,才会出现交叉反应。

2)敏感性高

在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等敏感性不高的技术,那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP三步法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合,这样高敏感性的抗体抗原反应,使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。


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所以它是可以减少背景染色。滴加试剂时要均匀、足够,要比切片上的组织界限宽出0.05~0.35 cm防止出现边缘效应。即使是同一种抗体,由于产品批号不同,其效价可能有差异,因此,新购进的抗体一定要进行预实验,找出比较好条件并进行记录。此外,组织浸液的温度,切片烘烤的温度控制,实验操作过程中的室内温度及抗体的效价等都是影响免疫组化标记质量的重要因素。因此,耐心细致的工作态度,标准化、规范化的操作,是完成实验的基本保证。江苏IHC免疫组化公司哪里有