减少或消除非特异性染色的方法 组织中非抗原抗体反应出现的阳性染色称为非特异性背景染色，较好常见的原因是蛋白吸附于高电荷的胶元和结缔组织成分上。有效方法是在用首先抗体前加制备第二抗体动物之非免疫血清（1：5-1：20）封闭组织上带电荷基团而除去与首先抗体非特异性结合。必要时可加入2%-5%牛血清白蛋白，可进一步减少非特异性染色。作用时间为10-20min。也可用除制备首先抗体以外的其它动物血清（非免疫的）。有明显溶血的血清不能用，以免产生非特异性染色。免疫荧光染色时，可用0.01%伊文氏兰(PBS溶液)稀释荧光抗体,对消除背景的非特异性荧光染色有很好的效果。当然使用特异性高、效价高的首先抗体是较好重要的条件。洗涤用的缓冲液中加入0.85%~1%NaCl成为高盐溶液,充分洗涤切片,能有效的减少非特异性结合而减少背景染色。免疫组化哪里好就找融享生物。内蒙古动物实验免疫组化实验公司
——90年代分子杂交技术、原位杂交技术、免疫细胞化学分类方法迅速发展。——2000年各种免疫组化技术更加成熟，使免疫组化技术成为当今生物医学中形态、功能代谢综合研究的一项有力工具。其应用范围深达医学各个学科，是目前生命科学工作者应该掌握的基本技术之一。免疫组化技术技术分类（1）根据染色方式分成：①贴片染色②漂浮染色（2）根据Ag—Ab结合方式分成：①直接法②间接法③多层法（3）按标记物的性质分成：①免疫荧光技术（免疫荧光法）②免疫酶技术（酶标抗体法、桥法、PAD法、ABC法）③免疫金属技术（免疫铁蛋白法、免疫金染色法、蛋白A金法）免疫组化技术标记物（1）必要性：组织细胞内Ag—Ab结合反应一般是不可见的，若在镜下检测，则必须具有可视性标记物。（2）常用标记物①荧光素：较常用的是异硫一氰酸荧光素（Fluoresceinisothiocyanate，FITC）——荧光显微镜下呈绿色荧光四乙基罗达明（rho—damineRB200）——荧光显微镜下发橙红色荧光②酶：辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶。③生物素：（Biotin）④铁蛋白金等：主要应用于免疫电镜。其他：如同位素（因涉及污染和防护难一般不用）免疫组化技术应用凡是组织细胞内具有抗原性的物质。内蒙古动物实验免疫组化实验公司上海免疫组化，免疫荧光性价比找融享生物高效率周期快。
基本原理编辑
抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来，以期达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究。分类编辑
免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。
实验为例
从我接触的很多本科生和研究生中发现，他们的确是免疫组化“新手”，他们只注重如何做和较好终的结果，但对为什么这样做不太感兴趣。他们常按照网上所说的方法，摸索好的抗体浓度和条件后做出很漂亮的染色结果后，他们就认为自己已经掌握了免疫组化方法了，结果不求上进，更换一种新抗体后或实验出现异常结果后就很难做出来了。当然，免疫组化对于我来说，做过很多，但也不能说什么都会，只不过我做的多了，失败多了和思考多了，可能比新手多了解一些其中的诀窍，拿来与大家进行分享。此外，我个人经验不可能面面俱到，还需要更多有经验的高手一起分享、纠正和补充。在这里。
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目的 比较抗原修复对多聚甲醛固定脑组织冰冻切片免疫组化结果的影响。 方法 成年SD大鼠用4%多聚甲醛经心腔灌注、固定后，分别经15%及30%蔗糖梯度脱水后进行冰冻切片（10μm），取相同部位切片20张，用兔抗Ach-M 2 受体多克隆抗体和小鼠抗DA-D 2 受体多克隆抗体作S-P免疫组化染色。 结果 经抗原修复的冰冻切片组的阳性结果比未经抗原修复组有明显提高。 结论 本实验次发现多聚甲醛固定的组织冰冻切片经抗原修复可以提高免疫反应敏感性或提升抗体效价。机制可能与多聚甲醛固定后对抗原有封闭作用有关。融享生物是提供免疫组化，免疫荧光，HE染色服务商之一。内蒙古动物实验免疫组化实验公司
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所以它是可以减少背景染色。滴加试剂时要均匀、足够，要比切片上的组织界限宽出0.05～0.35 cm防止出现边缘效应。即使是同一种抗体，由于产品批号不同，其效价可能有差异，因此，新购进的抗体一定要进行预实验，找出比较好条件并进行记录。此外，组织浸液的温度，切片烘烤的温度控制，实验操作过程中的室内温度及抗体的效价等都是影响免疫组化标记质量的重要因素。因此，耐心细致的工作态度，标准化、规范化的操作，是完成实验的基本保证。内蒙古动物实验免疫组化实验公司
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