上海水体微生物多样性分析

来源: 发布时间:2021-07-24

优化临床制备病毒宏基因组测序所用样本的方法:①介绍高通量病毒宏基因组测序的样本制备步骤,对临床样本的总核酸进行随机扩增;②检测了从血浆样本中富集/扩增DNA及RNA病毒的不同方法,一种包括过滤、核酸酶消化、在不同反应中随机扩增DNA及RNA的步骤是较好的;③随后在包含了不同病毒科的样本中验证此方法,可高读数地检测到大多数病毒序列,且优于现行的其它样本制备方法;④该方法不只适用于血浆样本,还可用于尿液、咽喉拭子等临床样本。和细菌的宏基因组相似,病毒宏基因组也是旨在研究微生物群体中的物种分布规律和差异。上海水体微生物多样性分析

在传统的诊断检测中对病原体的诊断检测是通过体外培养的方式进行,但是不同微生物的培养条件不一样;不同的微生物的培养技术要求也不一样;同时,体外培养受时间、空间和培养技术人员的限制。宏基因组分析技术是一种的病源体诊断检测技术,可以在不通过任何培养过程的条件下,通过基因序列的比对,发现和鉴别罕见病源体引起的疾病,从而针对性地使用药物,使病源微生物传染所形成的疾病的准确、高效。元基因组(宏基因组)学研究不要求对每个微生物进行分离、纯化和培养,而是直接从样品中提取基因组DNA后进行测序分析。通过元基因组测序,能够揭示微生物群落多样性、种群结构、进化关系、功能活性及环境之间的相互协作关系,极大地扩展了微生物学的研究范围。上海水体微生物多样性分析宏基因组测序技术,克服了传统的纯培养方法的技术限制。

传统上人类血液被认为是无菌的,微生物血浆细胞游离DNA(mcfDNA)可能有两种来源,包括微生物(细菌,病毒或噬菌体)的易位,这是指属于人类微生物组的微生物细胞或其组成部分通过与外部环境连通的上皮粘膜进入循环系统。另外,当组织粘膜被局部传染(例如口腔,肺和皮肤传染)或物理损伤(例如侵入性的手术或意外伤害)破坏时,侵入性的病原体可能会偶然进入血液,在严重的情况下引起菌血症或病毒血症。一旦进入循环系统,微生物核酸就会通过循环核酸外切酶被降解,然后形成小的DNA的片段,即微生物血浆细胞游离DNA(mcfDNA)。mcfDNA是一种新兴的传染性疾病诊断生物标志物。尽管绝大多数cfDNA来自于患者自身的细胞,但在急性传染期间可从血浆中检测到微生物病原体的微量物质。

病毒宏基因组学:病毒宏基因组学是宏基因组学的一个分支,指研究特定环境中的病毒群落的一门技术。近年来随着新测序技术的不断发展,尤其是第二代、第三代测序仪的出现,使病毒宏基因组学发展尤为迅速。对海洋中病毒群体进行了研究,阐明海水中病毒群体以噬菌体为主,并且是应用宏基因组学分析人粪便中不能培养的病毒群落,标志病毒宏基因组学的开端。病毒宏基因组学这一概念,其描述的是环境中的病毒群落―噬菌体。再次提到病毒宏基因组学这一概念,并对宏基因组学挖掘新病毒的方法进行了阐述,侧重于人和动物机体中的真核病毒群落。病毒宏基因组测序,无论是来自肠道还是水体或者土壤,样本都会伴随基因组数倍于病毒的细菌和宿主细胞。

对样本进行宏病毒组测序具有的意义:和细菌的宏基因组相似,病毒宏基因组也是旨在研究微生物群体中的物种分布规律和差异,通过大数据分析微生物群体的功能。通过对样本进行宏病毒组测序,我们可以了解单个样本里有什么病毒,相对含量是多少,优势物种是什么;还可以了解不同群体间物种分布有何差异,结合样本来源和其所属环境,指导下游的实验方向。于科研,好的群体和样本可以发表质量的学术论文;于临床,可以辅助临床医生进行微生物侵染类疾病诊断并在一定程度提供用药指导。随着数据库日趋完善,对样本进行宏病毒组测序以后,我们将获得越来越丰富的信息,它有朝一日会成为研究者非常常规的研究手段。探普生物的病毒测序具备:样本准备简单,商务流程通畅,回复消息及时。上海水体微生物多样性分析

病原宏基因组测序检测出病原体并报告相应被检测出的序列数,再依据大数据库判定是否为致病病原体。上海水体微生物多样性分析

宏基因组技术都是在细菌领域使用,病毒的样本收集困难、文库构建繁琐、数据库不完善,因此宏基因组技术未能获得普遍应用。生物进行病毒宏基因组测序,样品具备什么条件才可以获得比较质量的宏基因组分析效果?其他公司对用于测序的样本的要求较高。而在探普生物进行病毒宏基因组测序,基于探普的专有流程,样本要求非常低,不要求总量到达微克,探普有专门的收样标准和送样流程。为了保证后续数据的有效利用率,需要客户配合完成合格的取样步骤和样本前处理步骤。当然探普也提供适当的样本处理服务。核酸性质有RNA和DNA之分,核酸链还有单双链之分,而核酸本质不同和单双链的不同,进行同样的实验步骤其效率也不一样。上海水体微生物多样性分析